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2022
12-28背景資料C反應(yīng)蛋白(C-reactiveprotein,CRP)是相對分子質(zhì)量(115-140)×103的血清β球蛋白，是由5個相同的亞單位以非共價鍵結(jié)合而成的環(huán)狀五球體，這一特征性結(jié)構(gòu)使其歸類于五聚素（一組具有免疫防御特性的鈣結(jié)合蛋白）家族。低等動物同樣存在CRP，如在鱟、河蚌等中也發(fā)現(xiàn)過，但并不一定起急性期反應(yīng)蛋白的作用。CRP特征反應(yīng)是能在鈣離子存在的條件下特異性結(jié)合磷酸膽堿基團(tuán)。CRP在人的血清、CSF、胸腹水等多種體液中均可被檢測。臨床意義CRP作為炎癥標(biāo)志物，對于...
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12-28背景資料半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(CystatinC,Cys-C)，又名胱抑素C，廣泛存在于各種組織的有核細(xì)胞和體液中，是一種低分子量、堿性非糖化蛋白質(zhì)，分子量為13.3KD，由122個氨基酸殘基組成，可由機(jī)體所有有核細(xì)胞產(chǎn)生，產(chǎn)生率恒定。循環(huán)中的Cys-C僅經(jīng)腎小球濾過而被清除，是一種反映腎小球濾過率變化的內(nèi)源性標(biāo)志物，并在近曲小管重吸收，但重吸收后被代謝分解，不返回血液，因此，其血中濃度由腎小球濾過決定，而不依賴任何外來因素，如性別、年齡、飲食的影響，是一種反映腎小球濾過率...
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12-23流式細(xì)胞檢測技術(shù)是一種對液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒（如微球，細(xì)菌，小型模式生物等）逐個進(jìn)行快速定性、定量分析和分選的技術(shù)。該技術(shù)廣泛的運用于從基礎(chǔ)研究到臨床實踐的各個方面，涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗等領(lǐng)域。可檢測培養(yǎng)細(xì)胞、組織樣本、分離細(xì)胞等，其檢測結(jié)果以直方圖、二維圖或假三維圖表示，用于檢測免疫表型分析（白血病、淋巴瘤、干細(xì)胞、疾病診斷、藥物評價）、DNA含量及細(xì)胞周期分析、細(xì)胞特異性標(biāo)記物、細(xì)胞凋亡研究、基因轉(zhuǎn)染鑒定等方面。...
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12-16目前有多種蛋白標(biāo)記技術(shù)來幫助我們研究感興趣的蛋白質(zhì)的豐度、位置、相互作用、翻譯后修飾、功能，乃至監(jiān)測活細(xì)胞中的蛋白質(zhì)運輸?shù)葐栴}。目前有多種類型的標(biāo)記物和標(biāo)記方式可供選擇，但是針對特定的應(yīng)用應(yīng)當(dāng)選擇適合的標(biāo)記策略。代謝標(biāo)記策略代謝標(biāo)記策略是一種體內(nèi)標(biāo)記方法，在這種方法中，細(xì)胞被“喂養(yǎng)”了化學(xué)標(biāo)記的營養(yǎng)物，然后這些標(biāo)記物被摻入新合成的蛋白質(zhì)、核酸或代謝物中。然后，我們可以收集細(xì)胞并分離這些分子以獲得細(xì)胞生物過程的全局視圖。蛋白同位素標(biāo)記原理：蛋白同位素標(biāo)記是一種經(jīng)典的蛋白示蹤和蛋...
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12-9(一)獲得目的基因1、通過PCR方法：以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板，按基因序列設(shè)計一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點)，PCR循環(huán)獲得所需基因片段。2、通過RT-PCR方法：用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA，以mRNA為模板，逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈，以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體1、熒光素標(biāo)記的生物素載體酶切：將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點)進(jìn)行雙酶切，酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后，用膠回收Kit或凍融法回收載...
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12-8蘇木精是從熱帶植物蘇木中提取的一種色素，蘇木精不能直接染色，必須暴露在空氣中變成氧化蘇木精(又叫蘇木素)-“成熟"后才能使用。蘇木素和伊紅在組織學(xué)上被經(jīng)常使用，與碘液不同，這是一種染色劑。其他常用的含有蘇木素的染色劑有磷鎢酸蘇木素染色劑，也就是磷鎢酸與蘇木素的混合物。蘇木素染色劑經(jīng)常為組織的研究使用。明礬和三價鐵鹽常常被用作媒染劑，展示核和細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)。這些媒染劑的原理都是形成媒染劑-染料-組織復(fù)合體，從而顯示顏色。使用的鹽不同顏色也不同：當(dāng)用鐵鹽呈現(xiàn)深藍(lán)色顏色沉淀，用鋁鹽通常...
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12-2背景資料人絨毛膜促性腺激素(HumanChorionicGonadotropin，HCG)是由胎盤的滋養(yǎng)層細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，由α和β兩個亞基組成的異源二聚體。α亞基與垂體分泌的黃體生產(chǎn)素(LH)、促卵泡激素(FSH)和促甲狀腺激素(TSH)相似，β-亞基是HCG所特異的結(jié)構(gòu)。HCG的主要功能是刺激黃體，有利于雌激素和黃體酮的持續(xù)分泌，促進(jìn)子宮蛻膜的形成，使胎盤生長成熟。受精卵在子宮內(nèi)著床后，由胚胎發(fā)育為胎兒的過程中，胎盤的滋養(yǎng)層細(xì)胞產(chǎn)生大量的HCG，HCG可通過血液循環(huán)排...
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12-2背景資料促黃體激素(Luteinizinghormone，LH)也叫黃體生成素、促間質(zhì)細(xì)胞激素，是腺垂體前葉細(xì)胞分泌的一種糖蛋白類促性腺激素，由α和β兩條多肽組成的異源二聚體，存在于人的血液和尿液中。對于女性來說，LH與促卵泡刺激素(FSH)共同作用促進(jìn)卵泡成熟與排卵，使卵泡破裂形成黃體，并分泌雌激素和孕激素。LH的產(chǎn)生受下丘腦促性腺釋放激素的控制，同時受卵巢的正、負(fù)反饋調(diào)控。對于男性來說，LH的作用是促進(jìn)睪丸間質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育及睪酮的分泌。男性LH的正常值為1.24-8.62m...
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